50×TAE是(shi)(shi)一種(zhong)高(gao)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)的(de)(de)(de)緩(huan)(huan)沖液(ye)(ye)，主要成(cheng)分(fen)包括Tris（三羥甲基氨基甲烷）、醋酸鈉和(he)(he)EDTA（乙二胺(an)四乙酸）。它(ta)是(shi)(shi)一種(zhong)常用(yong)(yong)的(de)(de)(de)電(dian)(dian)泳(yong)緩(huan)(huan)沖液(ye)(ye)，廣應(ying)用(yong)(yong)于(yu)瓊脂糖凝膠(jiao)(jiao)(jiao)電(dian)(dian)泳(yong)中(zhong)(zhong)，用(yong)(yong)于(yu)分(fen)離(li)和(he)(he)分(fen)析(xi)DNA片(pian)(pian)段(duan)(duan)(duan)。50×TAE的(de)(de)(de)優勢高(gao)效分(fen)離(li)：TAE緩(huan)(huan)沖液(ye)(ye)在(zai)(zai)低濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)下(xia)(xia)具有較低的(de)(de)(de)離(li)子(zi)強度(du)(du)，適(shi)合分(fen)離(li)大(da)分(fen)子(zi)量的(de)(de)(de)DNA片(pian)(pian)段(duan)(duan)(duan)。它(ta)能(neng)夠提供穩(wen)定(ding)(ding)的(de)(de)(de)pH環境，確保DNA在(zai)(zai)電(dian)(dian)泳(yong)過程(cheng)中(zhong)(zhong)保持(chi)完(wan)整的(de)(de)(de)結(jie)構。兼容性強：50×TAE適(shi)用(yong)(yong)于(yu)多種(zhong)類(lei)型(xing)的(de)(de)(de)瓊脂糖凝膠(jiao)(jiao)(jiao)電(dian)(dian)泳(yong)，無論是(shi)(shi)低濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)還是(shi)(shi)高(gao)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)的(de)(de)(de)凝膠(jiao)(jiao)(jiao)，都能(neng)提供良好的(de)(de)(de)分(fen)離(li)效果。此外，它(ta)還兼容多種(zhong)核酸染料，如(ru)(ru)EB、GoldView等。經濟實(shi)用(yong)(yong)：50×TAE的(de)(de)(de)高(gao)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)設計（50倍(bei)濃(nong)(nong)(nong)縮）使其(qi)在(zai)(zai)使用(yong)(yong)時只需稀釋至工(gong)作(zuo)(zuo)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)（1×TAE），減(jian)少了儲存空間(jian)和(he)(he)使用(yong)(yong)成(cheng)本(ben)。使用(yong)(yong)方法使用(yong)(yong)50×TAE時，通常需要將其(qi)稀釋至1×工(gong)作(zuo)(zuo)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)。具體(ti)操(cao)作(zuo)(zuo)如(ru)(ru)下(xia)(xia)：取適(shi)量50×TAE液(ye)(ye)體(ti)。按照1:49的(de)(de)(de)比例(li)加入去離(li)子(zi)水，使其(qi)稀釋至1×TAE。配制(zhi)好的(de)(de)(de)1×TAE可(ke)用(yong)(yong)于(yu)制(zhi)備瓊脂糖凝膠(jiao)(jiao)(jiao)或(huo)(huo)作(zuo)(zuo)為電(dian)(dian)泳(yong)槽(cao)的(de)(de)(de)緩(huan)(huan)沖液(ye)(ye)。在(zai)(zai)電(dian)(dian)泳(yong)過程(cheng)中(zhong)(zhong)，1×TAE能(neng)夠提供穩(wen)定(ding)(ding)的(de)(de)(de)電(dian)(dian)流和(he)(he)電(dian)(dian)壓條(tiao)件(jian)，確保DNA片(pian)(pian)段(duan)(duan)(duan)在(zai)(zai)凝膠(jiao)(jiao)(jiao)中(zhong)(zhong)均勻遷移。此外，TAE緩(huan)(huan)沖液(ye)(ye)在(zai)(zai)電(dian)(dian)泳(yong)結(jie)束后(hou)也便于(yu)后(hou)續(xu)的(de)(de)(de)DNA回收和(he)(he)純化(hua)(hua)操(cao)作(zuo)(zuo)。保存與注(zhu)意事項50×TAE液(ye)(ye)體(ti)應(ying)保存在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)或(huo)(huo)4℃條(tiao)件(jian)下(xia)(xia)，避免長時間(jian)暴(bao)露(lu)在(zai)(zai)高(gao)溫(wen)或(huo)(huo)強光下(xia)(xia)。Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在(zai)(zai)克隆(long)實(shi)驗(yan)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)應(ying)用(yong)(yong) 高(gao)保真擴增和(he)(he)預混(hun)染料簡化(hua)(hua)了克隆(long)實(shi)驗(yan)流程(cheng)，減(jian)少后(hou)續(xu)的(de)(de)(de)步(bu)驟。吉林CHO細(xi)胞穩(wen)定(ding)(ding)表達技(ji)術服務開(kai)發

M-MLVUltraReverseTranscriptase(200U/μL)是一種(zhong)高(gao)效(xiao)的(de)(de)(de)(de)逆轉錄(lu)(lu)酶，它(ta)基于MoloneyMurineLeukemiaVirus(M-MLV)逆轉錄(lu)(lu)酶進(jin)行基因工程(cheng)改造，以(yi)(yi)提(ti)(ti)(ti)高(gao)其熱穩定(ding)性(xing)和合(he)(he)(he)(he)成效(xiao)率。以(yi)(yi)下是該(gai)產品(pin)的(de)(de)(de)(de)一些關(guan)鍵特(te)點和應用(yong)(yong)(yong)(yong)：1.**高(gao)濃(nong)度(du)**：提(ti)(ti)(ti)供(gong)(gong)200U/μL的(de)(de)(de)(de)高(gao)濃(nong)度(du)，便于進(jin)行各種(zhong)規(gui)模的(de)(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)。2.**熱穩定(ding)性(xing)**：該(gai)酶具(ju)有較(jiao)高(gao)的(de)(de)(de)(de)熱穩定(ding)性(xing)，可以(yi)(yi)在(zai)高(gao)達55°C的(de)(de)(de)(de)溫度(du)下進(jin)行逆轉錄(lu)(lu)反(fan)應，有助(zhu)于打開RNA的(de)(de)(de)(de)二級(ji)結構，提(ti)(ti)(ti)高(gao)長(chang)鏈(lian)cDNA的(de)(de)(de)(de)合(he)(he)(he)(he)成效(xiao)率。3.**低(di)RNaseH活性(xing)**：與(yu)野(ye)生型M-MLV逆轉錄(lu)(lu)酶相(xiang)比，這(zhe)種(zhong)酶的(de)(de)(de)(de)RNaseH活性(xing)較(jiao)低(di)，有助(zhu)于保(bao)護RNA模板(ban)不(bu)(bu)被降解，從而提(ti)(ti)(ti)高(gao)長(chang)鏈(lian)cDNA的(de)(de)(de)(de)合(he)(he)(he)(he)成。4.**合(he)(he)(he)(he)成長(chang)鏈(lian)cDNA的(de)(de)(de)(de)能力**：能夠合(he)(he)(he)(he)成長(chang)達5kb甚至更長(chang)的(de)(de)(de)(de)cDNA，適(shi)(shi)合(he)(he)(he)(he)于需要合(he)(he)(he)(he)成全(quan)長(chang)或(huo)長(chang)片段cDNA的(de)(de)(de)(de)實(shi)(shi)驗(yan)。5.**適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)于多種(zhong)RNA模板(ban)**：可以(yi)(yi)用(yong)(yong)(yong)(yong)于從總RNA或(huo)mRNA模板(ban)合(he)(he)(he)(he)成cDNA鏈(lian)，適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)于實(shi)(shi)時熒光定(ding)量RT-PCR、3-和5-RACE等(deng)(deng)實(shi)(shi)驗(yan)。6.**儲存條件**：建(jian)議在(zai)-20°C下保(bao)存，以(yi)(yi)保(bao)持酶的(de)(de)(de)(de)活性(xing)和穩定(ding)性(xing)。7.**使用(yong)(yong)(yong)(yong)方便**：通常，該(gai)酶會(hui)與(yu)5XFirst-StrandBuffer、0.1MDTT等(deng)(deng)組(zu)分一起提(ti)(ti)(ti)供(gong)(gong)，方便用(yong)(yong)(yong)(yong)戶進(jin)行逆轉錄(lu)(lu)反(fan)應。8.**產品(pin)規(gui)格(ge)**：提(ti)(ti)(ti)供(gong)(gong)不(bu)(bu)同規(gui)格(ge)的(de)(de)(de)(de)產品(pin)，以(yi)(yi)滿足不(bu)(bu)同實(shi)(shi)驗(yan)規(gui)模的(de)(de)(de)(de)需求。9.**應用(yong)(yong)(yong)(yong)廣**：適(shi)(shi)用(yong)(yong)(yong)(yong)于科研(yan)、分子(zi)診斷(duan)、基因表(biao)達分析等(deng)(deng)領域。福建(jian)人(ren)膠原蛋白(bai)技術服(fu)務臨床前研(yan)究在(zai)使用(yong)(yong)(yong)(yong)過(guo)程(cheng)中，需先(xian)將pTargetF質(zhi)粒上(shang)的(de)(de)(de)(de)sgRNA進(jin)行更新。

DNA Marker IV：精細的(de)DNA分子(zi)量(liang)(liang)標準DNA Marker IV 是一種(zhong)即用(yong)(yong)型(xing)的(de)DNA分子(zi)量(liang)(liang)標準，廣應用(yong)(yong)于(yu)瓊脂糖凝膠(jiao)電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)中(zhong)，用(yong)(yong)于(yu)估算(suan)DNA片(pian)段的(de)大小和進行粗略定(ding)量(liang)(liang)。它(ta)由多條線狀雙鏈DNA片(pian)段組成(cheng)，能夠為(wei)DNA分析提供精確的(de)分子(zi)量(liang)(liang)參考。產(chan)品特點組成(cheng)：DNA Marker IV 由6-7條線狀雙鏈DNA片(pian)段組成(cheng)，具體片(pian)段大小包括(kuo)200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用(yong)(yong)型(xing)設計：已預混1×Loading Buffer，使(shi)用(yong)(yong)時無需(xu)額(e)外(wai)添加(jia)，直接(jie)上(shang)樣(yang)。清晰的(de)條帶(dai)(dai)：電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)圖(tu)像清晰，背景干凈(jing)，條帶(dai)(dai)亮度均勻。穩(wen)定(ding)性高：在室溫下可(ke)穩(wen)定(ding)保(bao)存(cun)(cun)六個月，長期(qi)保(bao)存(cun)(cun)建議(yi)置于(yu)-20℃。使(shi)用(yong)(yong)方(fang)法(fa)上(shang)樣(yang)量(liang)(liang)：建議(yi)每次取(qu)2-5 ?L直接(jie)加(jia)入瓊脂糖凝膠(jiao)的(de)加(jia)樣(yang)孔(kong)中(zhong)。如果(guo)(guo)加(jia)樣(yang)孔(kong)較(jiao)寬(kuan)，可(ke)適當(dang)增(zeng)加(jia)上(shang)樣(yang)量(liang)(liang)。電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)條件(jian)：推薦使(shi)用(yong)(yong)1.0%-1.5%的(de)瓊脂糖凝膠(jiao)，1×TAE或(huo)0.5-1×TBE緩沖(chong)液，電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)壓4-10 V/cm，電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)時間20-40分鐘。染(ran)色(se)與觀察：電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)結束后，使(shi)用(yong)(yong)溴化乙錠（EB）或(huo)其他(ta)DNA染(ran)料染(ran)色(se)，紫外(wai)燈(deng)下觀察。注(zhu)意事項保(bao)存(cun)(cun)條件(jian)：建議(yi)低溫保(bao)存(cun)(cun)，避免反復凍融。瓊脂糖質(zhi)(zhi)量(liang)(liang)：電(dian)(dian)(dian)(dian)(dian)泳(yong)時應盡量(liang)(liang)選(xuan)用(yong)(yong)質(zhi)(zhi)量(liang)(liang)好的(de)瓊脂糖，以獲得比較(jiao)好分離效果(guo)(guo)。染(ran)料選(xuan)擇：如果(guo)(guo)使(shi)用(yong)(yong)Goldview等染(ran)料，由于(yu)靈敏度較(jiao)低，建議(yi)適當(dang)增(zeng)加(jia)Marker的(de)上(shang)樣(yang)量(liang)(liang)。

在大(da)腸桿(gan)菌中表(biao)(biao)達VLP（病毒樣顆粒(li)）時，確(que)(que)保蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)純(chun)度(du)(du)和(he)活(huo)(huo)性是(shi)至關(guan)重(zhong)要的(de)(de)(de)。以(yi)下是(shi)一(yi)些關(guan)鍵步驟和(he)技術：1.選擇正確(que)(que)的(de)(de)(de)表(biao)(biao)達載體(ti)：使(shi)用(yong)能夠高效表(biao)(biao)達目(mu)標(biao)蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)(de)質(zhi)(zhi)粒(li)載體(ti)，并(bing)確(que)(que)保含(han)有適(shi)當的(de)(de)(de)啟動子(zi)和(he)標(biao)簽(qian)（如(ru)(ru)His標(biao)簽(qian)、GST標(biao)簽(qian)等(deng)）以(yi)便(bian)于后續的(de)(de)(de)純(chun)化和(he)檢測(ce)(ce)。2.優化培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)(jian)：調整培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)(jian)，如(ru)(ru)溫度(du)(du)、pH、誘(you)導劑濃度(du)(du)和(he)培(pei)養(yang)時間，以(yi)化蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)(de)可溶性表(biao)(biao)達和(he)活(huo)(huo)性。3.細(xi)(xi)胞(bao)裂解：使(shi)用(yong)溫和(he)的(de)(de)(de)裂解方法，如(ru)(ru)超聲波(bo)或(huo)酶裂解，以(yi)保持蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)(de)活(huo)(huo)性并(bing)減(jian)少非(fei)特異性的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)降(jiang)解。4.親(qin)和(he)層(ceng)析：利用(yong)融合標(biao)簽(qian)（如(ru)(ru)His標(biao)簽(qian)）進行(xing)一(yi)步或(huo)多步親(qin)和(he)層(ceng)析，以(yi)高效地(di)從細(xi)(xi)胞(bao)裂解物(wu)中純(chun)化目(mu)標(biao)蛋(dan)(dan)白(bai)。5.離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)層(ceng)析：通(tong)過(guo)(guo)離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)層(ceng)析進一(yi)步去(qu)除(chu)(chu)親(qin)和(he)層(ceng)析中未去(qu)除(chu)(chu)的(de)(de)(de)雜(za)(za)質(zhi)(zhi)，提高蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)(de)純(chun)度(du)(du)。6.分子(zi)排阻層(ceng)析（SEC）：使(shi)用(yong)SEC來(lai)確(que)(que)保產品是(shi)均(jun)一(yi)的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)，去(qu)除(chu)(chu)多聚(ju)體(ti)和(he)大(da)分子(zi)雜(za)(za)質(zhi)(zhi)。7.活(huo)(huo)性檢測(ce)(ce)：通(tong)過(guo)(guo)生(sheng)物(wu)化學或(huo)生(sheng)物(wu)物(wu)理方法（如(ru)(ru)ELISA、WB、酶活(huo)(huo)性測(ce)(ce)定(ding)、圓二色譜CD等(deng)）來(lai)評估蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)(de)(de)活(huo)(huo)性和(he)構象。8.避免蛋(dan)(dan)白(bai)聚(ju)集(ji)：在表(biao)(biao)達和(he)純(chun)化過(guo)(guo)程中，通(tong)過(guo)(guo)添(tian)加穩定(ding)劑（如(ru)(ru)甘油、蔗(zhe)糖）和(he)使(shi)用(yong)低溫操作來(lai)防(fang)止蛋(dan)(dan)白(bai)聚(ju)集(ji)。在分子(zi)生(sheng)物(wu)學實(shi)驗中，準(zhun)確(que)(que)測(ce)(ce)定(ding)DNA片段的(de)(de)(de)大(da)小是(shi)實(shi)驗成功的(de)(de)(de)關(guan)鍵環節之(zhi)一(yi)。

終得(de)到的(de)(de)高純度(du)VLPs具有良好的(de)(de)穩定性(xing)(xing)(xing)和免(mian)疫(yi)(yi)(yi)原性(xing)(xing)(xing)。這種技(ji)術(shu)(shu)服務在(zai)多個(ge)領(ling)域發揮(hui)著重(zhong)要作用(yong)。在(zai)疫(yi)(yi)(yi)苗研(yan)發方面，VLPs可(ke)以(yi)模(mo)擬病(bing)毒的(de)(de)天然(ran)結構，激發人體(ti)(ti)的(de)(de)免(mian)疫(yi)(yi)(yi)反應，產(chan)生(sheng)(sheng)有效的(de)(de)免(mian)疫(yi)(yi)(yi)保護，為(wei)預(yu)防各種傳(chuan)染(ran)病(bing)提(ti)供了新的(de)(de)途徑。例如(ru)，針對某些病(bing)毒性(xing)(xing)(xing)疾病(bing)，通過大腸(chang)桿菌表(biao)達(da)(da)的(de)(de)病(bing)毒樣顆(ke)粒疫(yi)(yi)(yi)苗能(neng)夠誘導機體(ti)(ti)產(chan)生(sheng)(sheng)特異性(xing)(xing)(xing)抗體(ti)(ti)，增(zeng)強人體(ti)(ti)對病(bing)毒的(de)(de)抵抗力。在(zai)生(sheng)(sheng)物醫學(xue)研(yan)究中，VLPs還可(ke)以(yi)作為(wei)載(zai)體(ti)(ti)，用(yong)于運載(zai)藥(yao)物、基因等生(sheng)(sheng)物活性(xing)(xing)(xing)分子，實(shi)現精細的(de)(de)疾病(bing)和診斷。該(gai)產(chan)品(pin)預(yu)混了電(dian)泳(yong)指示劑，PCR產(chan)物可(ke)直接進行(xing)電(dian)泳(yong)分析，無需(xu)額外添加Loading Dye進一步提(ti)高了實(shi)驗(yan)的(de)(de)便捷性(xing)(xing)(xing)。黑龍江畢赤酵母分泌表(biao)達(da)(da)技(ji)術(shu)(shu)服務開發

Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在(zai)復雜(za)模板擴增中的(de)表現 其優化(hua)的(de)緩沖液和酶組(zu)合能夠高效擴增高GC含量(liang)。吉林CHO細胞(bao)穩定表達技(ji)術服務開發(fa)

TthDNAPolymerase在基因(yin)(yin)(yin)克(ke)隆(long)(long)實驗(yan)中(zhong)的(de)具體作用(yong)主要體現在以(yi)(yi)(yi)下幾(ji)個方(fang)面：1.**PCR擴增(zeng)(zeng)**：TthDNAPolymerase在有(you)Mg2+存(cun)在的(de)條件下，具有(you)DNA多(duo)聚(ju)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)(yi)用(yong)于(yu)PCR反(fan)應，高效擴增(zeng)(zeng)目標DNA片段(duan)。這(zhe)對于(yu)獲取足夠量的(de)特(te)(te)定基因(yin)(yin)(yin)片段(duan)至關重要，因(yin)(yin)(yin)為(wei)(wei)這(zhe)些片段(duan)將(jiang)用(yong)于(yu)后續的(de)克(ke)隆(long)(long)步驟。2.**逆(ni)轉(zhuan)錄PCR（RT-PCR）**：TthDNAPolymerase具有(you)逆(ni)轉(zhuan)錄酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，在Mn2+存(cun)在的(de)情(qing)況下，此(ci)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)增(zeng)(zeng)強，使(shi)得(de)該酶(mei)(mei)(mei)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)(yi)用(yong)于(yu)一管(guan)式(shi)RT-PCR。這(zhe)意味著它可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)(yi)在同一反(fan)應管(guan)中(zhong)完成逆(ni)轉(zhuan)錄和(he)PCR反(fan)應，簡化(hua)了從RNA模(mo)板(ban)獲取cDNA的(de)過(guo)程。3.**耐(nai)(nai)高溫特(te)(te)性(xing)(xing)(xing)(xing)**：TthDNAPolymerase的(de)耐(nai)(nai)熱性(xing)(xing)(xing)(xing)比Taq酶(mei)(mei)(mei)高，適用(yong)于(yu)高GC含量模(mo)板(ban)的(de)擴增(zeng)(zeng)。這(zhe)一特(te)(te)性(xing)(xing)(xing)(xing)對于(yu)克(ke)隆(long)(long)高GC含量的(de)基因(yin)(yin)(yin)尤其重要，因(yin)(yin)(yin)為(wei)(wei)高GC含量可(ke)(ke)(ke)能導致其他(ta)DNA聚(ju)合酶(mei)(mei)(mei)效率低下。4.**3→5外切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)的(de)缺(que)乏**：TthDNAPolymerase基本上沒有(you)3→5外切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，這(zhe)使(shi)得(de)它在需(xu)要精確末(mo)端(duan)的(de)克(ke)隆(long)(long)實驗(yan)中(zhong)非常有(you)用(yong)，因(yin)(yin)(yin)為(wei)(wei)它可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)(yi)減少由于(yu)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)引起(qi)的(de)末(mo)端(duan)修飾。5.**5→3外切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)**：TthDNAPolymerase具有(you)5→3外切(qie)(qie)酶(mei)(mei)(mei)活(huo)(huo)(huo)(huo)性(xing)(xing)(xing)(xing)，這(zhe)在需(xu)要精確切(qie)(qie)除DNA片段(duan)的(de)末(mo)端(duan)或(huo)進行其他(ta)特(te)(te)殊類(lei)型的(de)克(ke)隆(long)(long)時非常有(you)用(yong)。吉林CHO細(xi)胞穩定表達技術服務開發